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• 熊去氧胆酸(UDCA, 1b)是名贵中药熊胆所含的主要成分，临床上有效治疗胆结石类疾病以及慢性肝病，在动物胆酸医药合成领域具有特殊地位^[1~3](图式 1)。含有多个自由羟基的UDCA是水溶性的胆汁酸，可以促进胆固醇性胆结石的溶解，有清肝利胆的功效^[4~6]。目前，UDCA的天然来源是活熊取胆或熊胆汁，方法操作复杂，有违人文道义，并且天然熊胆的来源日趋减少，因此UDCA的人工合成及半合成是一项亟待解决的研究课题。UDCA的制备通常由鹅去氧胆酸(1c)^[7]经过简单官能团转化获得。Pedrini等^{[8, 9]}使用石胆酸来合成UDCA，同时这种酶催化的合成方法也可以用于合成熊胆酸(UCA)^[10]。由于猪去氧胆酸(1a)与UDCA的结构差异仅在C6和C7位的羟基取代不同，且廉价易得的来源使其更具研究价值。Zhou等^[11]由猪去氧胆酸出发，经过7步反应以15%的总收率得到UDCA。该合成方法总产率不高，反应过程使用Jones氧化、强酸强碱试剂，对环境造成危害；同时，要用锂液氨还原得UDCA，反应操作不便且后处理麻烦。

  图式 1

  

  图式 1.  不同类型动物胆酸

  Scheme 1.  Different types of bile acids

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  考虑到上述不足，本文采用廉价易得的猪去氧胆酸为原料，使用环境友好型试剂通过两种方法(路线分别见图式 2和图式 3)完成UDCA的合成，可为医药产品的开发提供参考。此外，鉴于胆酸盐是一类多羟基多烷基化合物，具备表面活性剂的潜力，本文还对其聚集行为进行初步探索。

  图式 2

  

  图式 2.  UDCA的合成路线一

  Scheme 2.  Synthetic route 1 of UDCA

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  图式 3

  

  图式 3.  UDCA的合成路线二

  Scheme 3.  Synthetic route 2 of UDCA

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  1.   实验部分

  1.1   仪器与试剂

  TENSOR27型傅里叶变换红外光谱仪(Bruker公司)；AV-400型400MHz超导核磁共振谱仪(Bruker公司)；Agilent GC/MS 5975C型质谱仪(Agilent公司)。

  猪去氧胆酸(95%，成都元成生物科技有限公司)、石胆酸盐(分析纯，98.8%)、胆酸盐(分析纯，99%)、三氟苯乙酸(分析纯，99%)购自于上海泰坦化学有限公司。其他试剂与溶剂均为市售分析纯级。

  1.2   化合物的合成

  3α, 6α-二羟基-5β-胆酸盐(2)：向装有搅拌子的100mL三颈瓶中依次加入50mL甲醇和6.00g(15.3mmol)猪去氧胆酸，搅拌至完全溶解，置于冰浴中逐滴加入0.5mL浓硫酸，室温下反应5h。加入10mL饱和NaHCO₃溶液稀释，减压蒸除部分甲醇。用3×25mL乙酸乙酯萃取，合并有机相，依次用25mL饱和NaHCO₃溶液和25mL饱和NaCl溶液洗涤，无水Na₂SO₄干燥，静置过夜，过滤，滤液经减压浓缩，得白色粉末状固体6.22g，产率为99.0%。[α]_D²⁵：15.7(c=10g/L，乙醇)；¹H NMR (400MHz，CDCl₃)δ：0.66(s，3H，18-H)，0.94(t，J=1.4Hz, 6H)，3.63(m，1H，6α-H)，3.69(s，3H)，4.07(m，1H，3α-H)；¹³C NMR (101MHz，CDCl₃) δ：12.05，18.28，20.79，23.56，24.24，28.16，29.27，30.15，30.98，31.10，34.85，34.89，35.39，35.63，35.97，39.89，39.99，42.87，48.47，51.54，55.96，56.21，68.05，71.54，174.79；HRMS(ESI)：[C₂₅H₄₂O₄+Na]⁺，理论值429.2975，实测值429.2965。

  3α-羟基-6-羰基-5β-胆酸盐(3)：室温下向装有搅拌子的250mL三颈瓶中依次加入100mL丙酮、2.40g(5.91mmol)化合物2、5mL H₂O和0.4mL乙酸，搅拌至溶液澄清。分10批在20min内加入2.10g(11.8mmol)N-溴代丁二酰亚胺(NBS)。待原料点消失，迅速加入20mL饱和Na₂SO₃溶液淬灭反应，并常温搅拌15min。减压蒸除部分溶剂，用2×25mL乙酸乙酯萃取，有机相依次用2×25mL饱和NaHSO₃溶液、2×25mL饱和NaHCO₃溶液、3×15mL饱和NaCl溶液洗涤，无水Na₂SO₄干燥，过滤，滤液经减压浓缩后硅胶柱层析(淋洗剂为乙酸乙酯/石油醚，体积比1:5)分离纯化，得白色结晶状固体2.0g，产率为85%。[α]_D²⁵：-7.1 (c=10g/L，CH₂Cl₂)；¹H NMR (400MHz，CDCl₃) δ：0.70(s，3H，18-H)，0.94(d，J=6.4Hz，3H，21-H)，1.03(s，3H，19-H)，3.69(s，3H)，4.13(m，1H，3α-H)；¹³C NMR(101MHz，CDCl₃) δ：12.04，18.26，21.09，22.84，24.15，28.06，30.94，31.04，34.36，34.56，35.31，36.04，36.21，37.05，37.09，39.83，40.27，42.84，50.18，51.48，55.94，56.12，67.62，174.66，212.71；HRMS(ESI)：[C₂₅H₄₀O₄+Na]⁺，理论值427.2819，实测值427.2814。

  3α-乙酰氧基-6-羰基-5β-胆酸盐(4)：室温下向装有搅拌子的150mL三颈瓶中依次加入50mL无水CH₂Cl₂、1.50g(3.71mmol)化合物3、0.42mL(4.45mmol)乙酸酐、39.21mg(0.37mmol)4-二甲氨基吡啶(DMAP)，室温搅拌8h。加入10mL饱和NaHCO₃溶液稀释，减压蒸除部分溶剂，用2×15mL CH₂Cl₂萃取，有机相依次用2×15mL 1mol/L HCl溶液、3×25mL饱和NaHCO₃溶液、2×25mL饱和NaCl溶液洗涤，无水Na₂SO₄干燥，过滤，滤液经减压浓缩后硅胶柱层析(淋洗剂为乙酸乙酯/石油醚，体积比1:5)分离纯化，得淡黄色固体1.59g，产率为96%。[a]_D²⁵：-9.4 (c=10g/L，CH₂Cl₂)；¹H NMR(400MHz，CDCl₃) δ：0.70(s，3H，18-H)，0.94(d，J=6.4Hz，3H，21-H)，1.09(s，3H，19-H)，2.03(s，3H)，3.69(s，3H)，5.19(m，1H，3α-H)；¹³C NMR (101MHz，CDCl₃) δ：12.02，18.26，21.03，21.20，22.63，24.05，28.04，30.91，30.93，31.02，34.43，35.29，36.31，36.77，36.85，36.89，39.78，40.32，42.88，47.09，51.45，55.92，56.12，70.56，170.24，174.58，211.85；HRMS(ESI)：[C₂₇H₄₂O₅+Na]⁺，理论值469.2924，实测值469.2915。

  3α-乙酰氧基-6-[2-[(4-苄基)磺酰基]-二氮烯-5β-胆酸盐(5)：向装有搅拌子的50mL三颈烧瓶中加入15mL无水乙醇和0.80g(1.79mmol)化合物4，室温搅拌15min。分5批加入0.40g(2.15mmol)对甲苯磺酰肼，氮气保护下75℃回流45min。加入15mL乙醚稀释，减压蒸除部分溶剂，用15mL乙酸乙酯萃取，有机相用2×20mL饱和NaCl溶液洗涤，无水Na₂SO₄干燥，过滤，滤液经减压浓缩后硅胶柱层析(淋洗剂为乙酸乙酯/二氯甲烷/石油醚，体积比1:1:6)分离纯化，得白色固体0.96g，产率为87%。[α]_D²⁵：-18.3 (c=10g/L，CH₂Cl₂)；¹H NMR (400MHz，CDCl₃) δ：0.64(s，3H，18-H)，0.90(d，J=6.4Hz，3H，21-H)，0.96(d，J=6.4Hz，3H，19-H)，2.04(s，3H)，2.43(s，3H)，3.66(s，3H)，5.14(m，1H，3α-H)，7.31(d，J=7.8Hz，2H)，7.84(d，J=7.8Hz，2H)；¹³C NMR(101MHz，CDCl₃) δ：12.01，14.22，18.25，21.07，21.44，21.64，22.81，22.96，28.06，30.93，30.97，31.05，34.39，34.45，35.31，36.50，39.76，42.85，45.42，46.70，51.53，55.91，56.05，56.13，70.75，128.00，128.10，129.52，129.57，135.46，143.93，161.99，170.48，174.70；HRMS(ESI)：[C₃₄H₅₀N₂O₆S+Na]⁺，理论值637.3282，实测值637.3273。

  3α-乙酰氧基-6-乙烯基-5β-胆酸盐(6)：室温下向装有搅拌子的250mL三颈烧瓶中加入溶有1.30g(2.12mmol)化合物5的100mL重蒸甲苯，搅拌5min后加入溶有0.10g(12.72mmol)LiH的20mL重蒸甲苯，5min内添加完毕，将反应液升至60℃搅拌10min。一次性加入0.22mL四甲基乙二胺(TMEDA)，升温至90℃，氮气保护下回流18h。将反应液冷却至室温，加入12mL饱和NH₄Cl溶液淬灭反应，减压蒸除部分溶剂，用25mL乙酸乙酯萃取，有机相依次用2×25mL饱和NaHCO₃溶液、20mL饱和NaCl溶液洗涤，无水Na₂SO₄干燥，过滤，滤液经减压浓缩后硅胶柱层析(淋洗剂为乙酸乙酯/二氯甲烷/石油醚，体积比1:5:50)分离纯化，得白色固体528mg，产率为74%。[α]_D²⁵：3.1 (c=10g/L，CH₂Cl₂)；¹H NMR (400MHz，CDCl₃) δ：0.67(s，3H，18-H)，0.92(d，J=6.4Hz，3H，21-H)，1.02(s，3H，19-H)，2.07(s，3H)，3.67(s，3H)，5.14(m，1H，3α-H)，5.68(m，1H，6-H)，5.78(m，1H，7-H)；¹³C NMR (101MHz，CDCl₃) δ：11.96，18.28，21.40，21.45，22.25，22.83，24.15，28.07，31.00，31.05，32.79，33.81，34.63，35.26，35.32，39.99，40.25，42.85，46.98，51.49，55.87，55.91，71.86，125.11，128.13，170.58，174.76；HRMS(ESI)：[C₂₇H₄₂O₄+Na]⁺，理论值453.2975，实测值453.2946。

  3α-乙酰氧基-6, 7-环氧-5β-胆酸盐(7)：室温下向装有搅拌子的50mL三颈烧瓶中加入15mL CH₂Cl₂和675mg(1.57mmol)化合物6，随后置于冰浴反应。向反应液中加入324mg(1.88mmol)间氯过氧苯甲酸(m-CPBA)的10mL CH₂Cl₂溶液，10min内滴加完毕，升温至35℃反应1h。加入20mL饱和Na₂SO₃溶液淬灭反应，减压蒸除部分溶剂，加入20mL乙醚萃取，有机相依次用20mL饱和Na₂SO₃溶液、2×25mL饱和NaHCO₃溶液、2×20mL饱和NaCl溶液洗涤，无水Na₂SO₄干燥，过滤，滤液经减压浓缩后硅胶柱层析(淋洗剂为乙酸乙酯/二氯甲烷/石油醚，体积比1:4:60)分离纯化，得白色固体581mg，产率为83%。[α]_D²⁵：13.1 (c=10g/L，CH₂Cl₂)；¹H NMR (400MHz，CDCl₃) δ：0.66(s，3H，18-H)，0.91(s，3H，19-H)，0.93(d，J=1.5Hz，3H，21-H)，2.08(s，3H)，3.20(d，J=4.0Hz，1H，6-H)，3.22(d，J=3.6Hz，1H，7-H)，3.67(s，3H)，5.17(m，1H，3α-H)；¹³C NMR (101MHz，CDCl₃) δ：11.92，18.31，20.30，20.75，21.52，22.15，24.15，28.08，29.10，30.98，31.06，34.15，34.23，35.34，39.76，42.04，42.81，47.11，51.10，51.56，52.78，55.94，55.97，70.47，77.25，170.49，174.73；HRMS(ESI)：[C₂₇H₄₂O₅+Na]⁺，理论值469.2924，实测值469.2929。

  3α-乙酰氧基-7α-羟基-5β-胆酸盐(8)：室温下，将2.1g(4.71mmol)化合物7和1mL(12.44mmol)吡啶加入到15mL无水CH₂Cl₂中，随后将混合液转入高压釜内，加入200mg(10mol%)Pd/C，封闭高压釜，三次氢气置换后将釜内温度升温至40℃，50psi下反应24h。加入30mL蒸馏水稀释，过滤除去Pd/C。减压蒸除部分溶剂，加入30mL乙酸乙酯萃取，有机相依次用2×15mL 1mol/L HCl溶液、3×50mL饱和NaHCO₃溶液、2×25mL饱和NaCl溶液洗涤，无水Na₂SO₄干燥，TLC板显示α与β型产物并存，比例约为8:1。减压浓缩后硅胶柱层析(淋洗剂为乙酸乙酯/二氯甲烷/己烷，体积比1:4:45)分离纯化，得白色固体1.31g，产率为62%。[α]_D²⁵：27(c=10g/L，CH₂Cl₂，文献值^[22]：[α]_D²⁵：26)；¹H NMR (400MHz，CDCl₃) δ：0.68(s，3H，18-H)，0.95(d，J=3.1Hz，3H，21-H)，0.97(s，3H，19-H)，2.09(s，3H)，3.54(m，1H，7α-H)，3.70(s，3H)，4.91(q，J=3.1Hz，1H，3α-H)；¹³C NMR(101MHz，CDCl₃) δ：11.72，18.30，20.67，21.65，22.75，23.58，28.05，29.72，30.98，31.02，31.46，34.14，34.77，35.22，35.31，37.96，38.94，39.54，41.14，42.72，50.43，51.52，55.73，71.40，71.83，170.67，174.74；HRMS(ESI)：[C₂₇H₄₄O₅+Na]⁺，理论值471.3081，实测值471.3083。

  3α-乙酰氧基-7-羰基-5β-胆酸盐(9)：冰浴下，向装有搅拌子的100mL三颈烧瓶中加入30mL丙酮、460mg(1.03mmol)化合物8、0.07mL(1.24mmol)乙酸。逐滴加入溶有205mg(1.54mmol)N-氯代丁二酰亚胺(NCS)的10mL丙酮，15min滴加完毕后升至室温反应45min。加入15mL饱和Na₂SO₃溶液淬灭反应，减压蒸除部分溶剂，用20mL乙酸乙酯萃取，有机相依次用2×25mL饱和NaHCO₃溶液、25mL饱和NaCl溶液洗涤，无水Na₂SO₄干燥，静置过夜，过滤，减压浓缩，得白色固体440mg，产率为96%。[α]_D²⁵：-1 (c=10g/L，CH₂Cl₂，文献值^[23]：[a]_D²⁵：-1)；¹H NMR (400MHz，CDCl₃) δ：0.72(s，3H，18-H)，0.97(d，3H，J=6.4Hz，21-H)，1.07(s，3H，19-H)，2.08(s，3H)，3.03(t，J=14.4Hz，1H)，3.70(s，3H)，5.00(q，J=3.1Hz，1H，3α-H)；¹³C NMR (101MHz，CDCl₃) δ：11.75，18.32，21.06，21.49，21.89，23.57，28.01，30.95，31.00，31.05，34.93，35.01，35.29，36.58，36.91，37.93，39.41，42.60，42.77，44.76，50.34，51.53，55.74，71.14，170.26，174.67，212.50；HRMS(ESI)：[C₂₇H₄₂O₅+Na]⁺，理论值469.2924；实测值469.2917。

  3α, 7α-二羟基-5β-胆酸盐(1b)：室温下向装有搅拌子的100mL三颈烧瓶中加入15mL重蒸的n-BuOH、281mg(0.63mmol)化合物9。将86.85mg(3.78mmol)金属钠切成细小长条，擦干附着在金属钠表面的煤油，均匀加入反应液中，升温至60℃，氮气保护下回流2h。将反应液降至室温，加入15mL饱和NH₄Cl溶液淬灭反应，减压蒸除部分溶剂，用12mL CH₂Cl₂萃取，有机相依次用15mL饱和NaHCO₃溶液、2×15mL饱和NaCl溶液洗涤，无水Na₂SO₄干燥，过滤，滤液经减压浓缩后硅胶柱层析(淋洗剂为乙酸乙酯/甲醇/石油醚，体积比1:1:4)分离纯化，得白色固体153mg，产率为62%。[α]_D²⁵：54 (c=10g/L，乙醇；文献值^[24]，[α]_D²⁵：57)；¹H NMR (400MHz，DMSO-d₆) δ：0.62(s，3H，18-H)，0.90(m，6H，(19, 21)-H)，3.29 (m，1H，7β-H)，3.90(d，J=8.0Hz，1H)，4.47(d，J=4.5Hz，1H)，11.97(s，1H)；¹³C NMR(101MHz，DMSO-d₆) δ：12.50，14.55，18.77，19.02，21.32，23.78，27.18，28.64，30.72，31.24，34.23，35.31，37.74，38.19，39.19，42.65，43.48，43.56，55.15，56.31，56.50，69.92，70.19，175.35；HRMS(ESI)：[C₂₄H₄₀O₄+Na]⁺，理论值415.2819；实测值415.2811。

  3α-乙酰氧基-6-三甲基硅氧基-6-乙烯基-5β-胆酸盐(10)：30℃下向装有搅拌子的100mL Schlenk瓶中加入10mL无水THF，0.27g(33.61mmol)LiH粉末，抽真空充氮气3次，封闭搅拌10min。加入溶有5.25mL(42.01mmol)三甲基氯硅烷(TMSCl)的10mL THF溶液，5min内滴加完毕。待其混合均匀，向反应液中逐滴加入溶有1.5g(3.36mmol)化合物4的15mL THF溶液，5min内滴加完毕。待反应液逐渐变黄，逐滴加入10.51mL(33.61mmol)三乙胺，10min内滴加完毕，随后将反应液升至60℃反应6h。加入20mL饱和NH₄Cl溶液淬灭反应，用25mL乙酸乙酯萃取，有机相用饱和NaCl溶液洗涤，无水Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩得粗品，快速硅胶柱层析(淋洗剂为石油醚/乙酸乙酯，体积比10:1)得无色油状物1.55g，产率为89%。[α]_D²⁵：12.5 (c=10g/L，CH₂Cl₂)；¹H NMR (400MHz，CDCl₃) δ：0.24(s，9H)，0.67(s，3H，18-H)，0.94(d，J=6.5Hz，3H，21-H)，1.01(s，3H，19-H)，2.06(s，3H)，3.69(s，3H)，4.87(s，1H，7-H)，5.10(m，1H，3α-H)；¹³C NMR(101MHz，CDCl₃) δ：0.33，0.47，0.50，11.94，18.24，21.33，22.21，24.14，26.63，28.07，30.95，32.61，34.29，34.59，35.28，40.04，42.80，42.83，42.89，46.07，51.38，55.84，55.88，55.92，56.03，71.94，102.64，151.00，170.39，174.56；HRMS(ESI)：[C₃₀H₅₀O₅Si+Na]⁺，理论值541.3320，实测值541.3323。

  3α-乙酰氧基-7α-羟基-6-羰基-5β-胆酸盐(11)：冰浴下向100mL三颈烧瓶中加入30mL无水CH₂Cl₂、0.76g(1.47mmol)化合物10。逐滴加入溶有0.38g(2.20mmol)m-CPBA的20mL CH₂Cl₂，10min内滴加完毕，升至室温反应4h。加入20mL饱和Na₂SO₃溶液淬灭反应，减压蒸除部分溶剂，用25mL乙酸乙酯萃取，有机相依次用2×25mL饱和NaHCO₃溶液、25mL饱和NaCl溶液洗涤，无水Na₂SO₄干燥，过滤，滤液经减压浓缩后硅胶柱层析(淋洗剂为乙酸乙酯/石油醚，体积比1:12)分离纯化，得白色固体0.62g，产率为91%。[α]_D²⁵：51.3 (c=10g/L，CH₂Cl₂)；¹H NMR (400MHz，CDCl₃) δ：0.71 (s，3H，18-H)，0.94(d，J=6.4Hz，3H，21-H)，1.12(s，3H，19-H)，2.04(s，3H)，3.70(s，3H)，4.49(d，J=9.3Hz，1H，7-H)，5.23(m，1H，3α-H)；¹³C NMR (101MHz，CDCl₃) δ：：12.06，14.22，18.28，21.34，21.64，22.98，24.04，28.08，30.94，31.04，31.97，35.05，35.31，38.65，39.67，42.60，42.92，51.52，54.96，55.91，56.05，60.40，71.10，73.42，170.53，174.66，209.77；HRMS(ESI)：[C₂₇H₄₂O₆+Na]⁺，理论值485.2874，实测值485.2871。

  1.3   胆酸盐临界胶束浓度测定

  本文对胆酸盐的聚集行为进行研究，探索不同胆酸盐的临界胶束浓度(CMC)与其羟基数目及构型的关系。经文献^{[22, 25]}调研，CMC可以很好地反映一种物质作为表面活性剂的能力，本文通过芘荧光探针法测定CMC^{[26, 27]}，选择胆酸、猪去氧胆酸(1a)、鹅去氧胆酸(1c)、UDCA(1b)和紫罗兰胆酸(1d)5种羟基数量与构型不同的胆酸作为样品。选取338nm为芘的激发波长，在480~543 nm波长段中发射5个特征振动带的荧光峰，测定第三振动带与第一振动带的荧光强度比。

  2.   结果与讨论

  2.1   目标化合物的合成

  本文报道的合成路线之一是以廉价易得的猪去氧胆酸为原料，经Shapiro反应、选择性氧化、环氧化、构型翻转、脱保护等8步反应，完成了UDCA的合成(图式 2)。首先，猪去氧胆酸酯化得到化合物2，由于C3和C6位羟基有反应活性差异，对C3和C6两个位置的羟基进行选择性氧化。计划使用N-溴代丁二酰亚氨(NBS)或N-氯代丁二酰亚氨(NCS)来进行这一氧化反应。根据密度泛函理论(DFT)，计算化学已经可以成功预测很多化学反应的反应活性和位点^[12~16]。热力学控制的反应都是产生能量最低的产物，通过精确的计算可以得到反应不同位点产生的焓变以预测产物的能量，在此基础上，可以预测反应可能的产物和异构体的比例。本文使用Gaussian 09程序通过DFT计算结果发现^[17~19]，在使用NBS氧化时，C3和C6进行氧化时的能量差距大(48kcal/mol)，也就是说使用NBS时可获得更好的选择性。在实际进行实验后发现，使用NBS进行该氧化可以得到85%的产率和8/1的化学选择性(图式 4)。

  图式 4

  

  图式 4.  NBS对化合物2的选择性氧化

  Scheme 4.  Selective oxidation of 2 with NBS

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  C3-OH经乙酰基保护之后，对底物4进行Shapiro反应条件优化。底物4在乙醇回流的条件下可以与对甲苯磺酰肼反应以当量产率得到腙5。经文献调研^[20]，最经常用于Shapiro反应的碱是正丁基锂(n-BuLi)和二异丙基氨基锂(LDA)，然而由于甲酯的存在，这两种强碱无法使用。研究发现氢化锂可以应用于Shapiro反应并获得65%的产率；使用氢化钠也可以得到产物，但仅有54%的产率。另外，TMEDA与锂离子有特殊的鳌合作用，使得碳碳双键更容易形成，并可以完全抑制副产物6a的产生，使产率提高到74%(图式 5)。

  图式 5

  

  图式 5.  化合物5进行Shapiro反应的条件筛选

  Scheme 5.  Shapiro reaction condition optimization of compound 5

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  底物6双键经环氧化(使用m-CPBA)和选择性开环引入C7-OH，再使用NCS氧化、钠-正丁醇还原得到C7需要的构型，同时在反应中^[21]水解其他保护基，得到UDCA。

  报道的合成路线之二(图式 3)是将中间体4的羰基转化为烯醇后，使用三甲基硅基(TMS)直接在原位进行保护，所得产物10并不十分稳定，但仍可以分离得到。随后对烯醇进行Rubuttom氧化得到产物11，并且C7-OH羟基构型与天然产物相反。经毒性较低锌粉盐酸条件代替锌汞齐进行Clemmensen还原移除羰基，经与前述路线相同的氧化和还原反应，即可得到最终产物UDCA(图式 5)。

  2.2   聚集行为研究

  图 1中曲线表示室温及蒸馏水作溶剂下，芘的荧光电子振动带(Ⅲ/Ⅰ)强度之比与胆酸盐浓度(mmol/L)的关系图。含有较少羟基的胆酸盐分子对应有较低的CMC值，反映较低的表面活性剂溶解能力。羟基的位置与空间构型对荧光的强度比(Ⅲ/Ⅰ)有较大的影响，这就意味着化合物11的选择性还原和C6-OH与C7-OH的转换与底物的活性关系密切，而不是聚集行为。探究表明，胆酸类甾族化合物的CMC只与其分子内羟基的数目有关，而与羟基的构型与位置无关。

  图 1

  

  图 1.  芘的荧光强度比(Ⅲ/Ⅰ)与胆酸盐的浓度数据曲线图

  Figure 1.  The graph of intensity ratios (Ⅲ/Ⅰ) of pyrene fluorescence and bile salt concentration

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  3.   结语

  综上所述，采用廉价易得的猪去氧胆酸为起始原料通过8步反应得到具有药物活性分子熊去氧胆酸。考虑到整体路线产率较低，经改良以Rubuttom作为核心步骤，借助Clemmensen还原法可得到一条产率更高、条件温和、操作简单的反应路线。此外，还使用芘荧光探针法对胆酸盐的聚集行为进行了研究，发现其CMC仅与羟基数目有关，而与其构型无关。

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  图式 1  不同类型动物胆酸

  Scheme 1  Different types of bile acids

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  图式 2  UDCA的合成路线一

  Scheme 2  Synthetic route 1 of UDCA

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  图式 3  UDCA的合成路线二

  Scheme 3  Synthetic route 2 of UDCA

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  图式 4  NBS对化合物2的选择性氧化

  Scheme 4  Selective oxidation of 2 with NBS

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  图式 5  化合物5进行Shapiro反应的条件筛选

  Scheme 5  Shapiro reaction condition optimization of compound 5

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  图 1  芘的荧光强度比(Ⅲ/Ⅰ)与胆酸盐的浓度数据曲线图

  Figure 1  The graph of intensity ratios (Ⅲ/Ⅰ) of pyrene fluorescence and bile salt concentration

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